Catalogus

Zoeken

Zoeken kan via de modus 'eenvoudig zoeken' (één veld) of uitgebreid via 'geavanceerd zoeken' (meerdere velden). Zo kan je bv. zoeken op een combinatie van een auteursnaam (auteur), een jaartal (jaar) en een documenttype.

Boekenmand

Nuttige resultaten kan je aanvinken en toevoegen aan een mandje. De inhoud hiervan kan je exporteren of afdrukken (naar bv. PDF).

RSS

Op de hoogte blijven van nieuw toegevoegde publicaties binnen uw interessegebied? Dit kan door een RSS-feed (?) te maken van jouw zoekopdracht.

log in

Publicaties | Kaarten

nieuwe zoekopdracht

[ meld een fout in dit record ]

mandje (0): toevoegen | toon

---

Characterization of a dUTPase from the hyperthermophilic archaeon Thermococcus onnurineus NA1 and its application in polymerase chain reaction amplification Cho, Y.; Lee, H.S.; Kim, Y.J.; Kang, S.G.; Kim, S.J.; Lee, J.-H. (2007). Characterization of a dUTPase from the hyperthermophilic archaeon Thermococcus onnurineus NA1 and its application in polymerase chain reaction amplification. Mar. Biotechnol. 9(4): 450-458. https://dx.doi.org/10.1007/s10126-007-9002-8 In: Marine Biotechnology. Springer-Verlag: New York. ISSN 1436-2228; e-ISSN 1436-2236

---

Beschikbaar in	Auteurs
VLIZ: Non-open access 353565 [ aanvragen ]

---

Trefwoorden

Acids > Organic compounds > Organic acids > Nucleic acids > DNA DNA polymerase PCR Peptides > Proteins > Enzymes > Transferases > Nucleotidyltransferases > Dna polymerase Polymerase chain reaction Thermococcus onnurineus Bae, Kim, Yang, Lim, Heon, Lee, Kang, Kim & Lee, 2006 [WoRMS] Marien/Kust

Author keywords

DNA polymerase; dUTPase; PCR amplification; Thermococcus onnurineus NA1

---

Auteurs		Top
Cho, Y. Lee, H.S. Kim, Y.J.	Kang, S.G. Kim, S.J. Lee, J.-H.

---

Abstract

Genomic analysis of the hyperthermophilic archaeon Thermococcus onnurineus NA1 (TNA1) revealed the presence of a 471-bp open reading frame with 93% similarity to the dUTPase from Pyrococcus furiosus. The dUTPase-encoding gene was cloned and expressed in Escherichia coli. The purified protein hydrolyzed dUTP at about a 10-fold higher rate than dCTP. The protein behaved as a dimer in gel filtration chromatography, even though it contains five motifs that are conserved in all homotrimeric dUTPases. The dUTPase showed optimum activity at 80°C and pH 8.0, and it was highly thermostable with a half-life (t 1/2) of 170 min at 95°C. The enzymatic activity of the dUTPase was largely unaffected by variations in MgCl2, KCl, (NH 4)2SO4, and Triton X-100 concentrations, although it was reduced by bovine serum albumin. Addition of the dUTPase to polymerase chain reactions (PCRs) run with TNA1 DNA polymerase significantly increased product yield, overcoming the inhibitory effect of dUTP. Further, addition of the dUTPase allowed PCR amplification of targets up to 15 kb in length using TNA1 DNA polymerase. This enzyme also improved the PCR efficiency of other archaeal family B type DNA polymerases, including Pfu and KOD.

---

Alle informatie in het Integrated Marine Information System (IMIS) valt onder het VLIZ Privacy beleid

Top | Auteurs